转基因鉴定,您还在提DNA?
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篇首语:本文由小常识网(cha138.com)小编为大家整理,主要介绍了转基因鉴定,您还在提DNA?相关的知识,希望对你有一定的参考价值。
说起提基因组DNA做模板,上千份样本让人心烦意乱,每到采样季,多少研究生都不愿想起那些年洗过的研钵和无数的EP管。菌落PCR,各种处理后,酵母、农杆菌等还没裂开,而做实验的您估计脑袋快要炸开了!多想有一款靠谱的直接PCR产品来拯救实验,拉您跳出基因组DNA提取泥潭!聚合美超光速Mix及PCR扩增伴侣,免提基因组DNA,直接PCR,带您进入伟大的PCR新时代!
从样本到PCR出结果,1小时搞定!
注:聚合美超光速Mix与PCR最佳扩增伴侣是一对最佳搭档,PCR扩增伴侣(一种新型裂解液)能够高效的打开细胞释放基因组DNA, 裂解液带入后续的PCR体系,也不会影响后续PCR实验。
最佳搭档,直接PCR不再是问题
1、大量转基因植物的阳性苗鉴定
•转基因拟南芥,水稻,玉米,小麦,大豆,谷子一次转基因要做几十甚至上百份材料。
•对100多份苗提取DNA,工作量非常大。
•有时还容易出现交叉污染
如何解决:MF859简单处理后做模版 。
叶片样本:剪很小叶片加入10 µl 裂解液混匀,沸水浴3-5 分钟,离心取1-2µl作为PCR模板 。
实验示例一:大豆叶片及豆粉直接PCR鉴定
超光速mix对豆粉,叶片样本的PCR结果和CTAB法提取DNA的PCR结果没有差别。
2、作物新基因位点的图位克隆
•水稻,玉米,小麦,新基因位点的鉴定,一般通过图位克隆方法鉴定。
•图位克隆通常涉及1000多份甚至更多植株提取DNA,工作量巨大!
•如何将您从枯燥繁杂的提取实验中解放出来,是我们的目标!
如何解决:MF859 简单处理后做模版 。
叶片样本:剪很小叶片加入10 µl 裂解液混匀,沸水浴3-5 分钟,离心取1-2µl作为PCR模板 。
以前做法:提取100份基因组DNA ,用时一天,身心俱疲,怀疑人生!
使用超光速Mix:1小时轻松处理100份样品,更早得到实验结果!
实验示例二:水稻抗稻瘟病位点筛选
3、酵母/农杆菌/革兰氏阳性菌/放线菌的菌落PCR失败?
•酵母/农杆菌/革兰氏阳性菌/放线菌等微生物有非常厚的细胞壁。
•常规通过95度预处理5-10分钟,没法让细胞破裂 。
•无法释放DNA做模板,导致PCR失败。
如何解决:MF859简单处理后做模版。
菌液样本:菌液和裂解液体积比1:2混合,沸水浴3-5分钟,离心取1-2µl作为PCR模板。
菌落样本:挑少量菌加入10 µl 裂解液混匀,沸水浴3-5 分钟,离心取1-2µl作为 PCR模板。
实验示例三:酵母菌落PCR
以前做法:95℃预变性5min,没结果!10min,还是不行!!!怎么办???
使用超光速Mix:使用PCR分子伴侣处理,一次成功
4、鼠尾检测PCR结果不稳定或者失败
•常见鼠尾直扩裂解液都是先用强碱NaOH裂解鼠尾,然后用HCl中和。
•如果稍微加得多点少点,枪头沾点,都会导致pH急剧变化。
•这样的粗提物,对后续的PCR有极大的影响,使得结果非常不稳定。
如何解决:MF859 简单处理后做模版 。
鼠尾样本:剪很小鼠尾加入10 µl 裂解液混匀,沸水浴3-5 分钟,离心取1-2µl作为PCR模板 。
实验示例四:水稻稻飞虱幼虫直扩
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2018-04-17宏基因组实战qiime2-201802(三)去除引物和Barcode
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