PCR技术

Posted 2021-01-16 wangprince2017

qRT-PCR是指先由RNA进行反转录生成cDNA，然后以cDNA为模板进行检测，检测的是该cDNA的含量，而cDNA由特定的RNA逆转录而来，所以间接地检测了RNA的含量。

 

基因表达： 转录：DNA到RNA 翻译：RNA到氨基酸、蛋白 一般认为RNA， mRNA的量和最后的蛋白量一致「不考虑转录后调控」； 当然目前绝大数研究基因表达的都是qPCR和WB一起来。

基因表达水平一定意义上就是转录水平，转录出来的RNA经反转录成cDNA，荧光定量PCR时经多次复制扩增，使得其含量到达一定值， 所以复制的循环数越大，表达量越小。或许可以看成是把转录出来的RNA的含量放大很多倍后再来看基因间转录水平差异，也就是表达量差异。

 

 

RT-PCR

 

分子定量检测

qRT-PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction，qRT-PCR)技术已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法，能够专一、灵敏、快速、高重复的精确定量起始模板的浓度，可用于miRNA、mRNA、lncRNA、circRNA及DNA等分子定量检测。

mRNA在生物体内表达量较低，一般难以检测，却参与众多生理活动过程的调控。伯信生物设计特异性引物通过SYBR green法或者Taqman法可检测微量样品的ncRNA的表达水平。

 

 

 

客户提供

①　ncRNA名称及ID；

②　组织（大于100mg）、细胞（大于10⁶）、血清或总RNA（大于0.5ug/样品）；

③　物种信息；

 

伯信提供

①　qRT-PCR的原始数据；

②　实验报告（实验仪器、试剂、方法、结果、结论）；

 

结果实例