一个基因转录后存在不同的剪接体,我需要做反转录PCR扩增该基因所以mRNA,怎么选mRN
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两种反转录的方法，一种是用oligoT作为引物，把所有的mRNA都反转录了，这个应该是有用的。另一种方法，是用特异性的引物去反转录，这个的话，你要看这种基因的转录后剪切有没有把最后一个外显子切掉的情况，如果没有的话，也是可以用Reverse primer去反转录的。mRNA的选择方面，只要你提取mRNA的细胞是有这种基因表达，且存在可变剪切的机制，这样提取的mRNA就可以做下一步实验的。 参考技术A 检测剪切体的方法主要是用5'引物加oligo dT做PCR，一般都能看到不同长度的产物；
同样用保守性比较强的探针做northern blotting也可以，但目前PCR用得多
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